分光光度計是一種廣泛使用的光學式分析儀器，為保證這種分析儀器的準確可靠，國家技術(shù)監(jiān)督局將其列為強檢儀器，并先后頒布了各類分光光度計的檢定規(guī)程。為了配合檢定規(guī)程的實施，近年來軍隊各醫(yī)學計量機構(gòu)都相繼配備了標準濾光片用于各類分光光度計的檢定。但是，由于分光光度計的種類繁多，各種分光光度計其適用的檢定規(guī)程及標準術(shù)光片也不盡相同，因此在具體檢定過程中，部分計量人員往往感到難以開展或不能完成某臺機器檢定的全過程。下面就幾種主要標準濾光片在分光光度計檢定中的應(yīng)用方法作一介紹。

1、鐠釹濾光片和氧化鈥濾光片

        鐠釹濾光片和氧化鈥濾光片是一種具有特征吸收峰(或透射峰)的波長標準物質(zhì)，其吸收峰多而穩(wěn)定，波長范圍分別是: 400~900nm(鐠釹濾光片)、200~700nm (氧化鈥濾光片)，主要用于檢定紫外、可見分光光度計的波長準確度與波長重復(fù)性，特別適用于具有自動掃描功能的分光光度計上述兩項指標的檢定。

        其檢定方法是:①接通被檢儀器電源,預(yù)熱30分鐘；②設(shè)置儀器參數(shù)：置儀器于波長掃描方式，帶寬為2.0nm、響應(yīng)速度“中”、數(shù)據(jù)方式為“吸光度”、波長范圍為200nm~900nm;③不放任何樣品對儀器進行100%基線校正;④將濾光片垂直放入樣品架，以空氣為參比進行波長掃描，測出吸收光譜;⑤利用儀器的數(shù)據(jù)處理功能找出濾光片的吸收峰值波長，根據(jù)規(guī)程要求在紫外光區(qū)內(nèi)選1個峰值點，可見光區(qū)內(nèi)選3個峰值點,連續(xù)測定3次。

        對于不具有自動掃描功能的儀器，在檢定時也要先對儀器進行預(yù)熱、校正，采用逐點測試法測定吸收峰值。手動掃描找點往往難以掌握,必須在吸收點上下反復(fù)多次才能確定。

2、雜散光濾光片

        雜散光是指射到儀器探測器上的與測試波長不同的其它波長的光,是分光光度計的重要誤差來源之一,因此雜散光也是分光光度計的一項重要技術(shù)指標。此組濾光片共有4塊,編號為：065-22、065- 38、065- 42、065一70,分別對應(yīng)220nm、380nm、 420nm、700nm.其在對應(yīng)的波長處的透射比等于零。所以選用某一雜散光濾光片所測定的被檢儀器的透射比值,即為該儀器在測試波長下的雜散光。

       檢定規(guī)程對不同的分光光度計的雜散光測定規(guī)定了相應(yīng)的測試波長，紫外可見分光光度計的測試波長為220nm和 380nm，棱鏡式可見分光光度計的測試波長為420nm和700nm，光柵式可見分光光度計的測試波長為380nm，因此在檢定時必須根據(jù)不同的儀器選用合適的濾光片。具體方法是:①使被檢儀器通電并預(yù)熱30分鐘;②設(shè)定儀器參數(shù)于光度測量方式、帶寬為2.0nm ;③按要求設(shè)定波長,校正100%基線;④選合適的濾光片放入樣品架,以空氣為參比一次測定,其透射比讀數(shù)即為被檢儀器在測試波長下的雜散光。

        以上就幾種主要標準濾光片對分光光度計的波長準確度、波長重復(fù)性、透射比正確度、透射比重復(fù)性、雜散光等5個重要技術(shù)指標的檢定操作方法作了全面系統(tǒng)的介紹。并結(jié)合檢定規(guī)程就測量數(shù)據(jù)的處理做了必要的說明,以方便出具《檢定證書》。不同類型的分光光度計,均可根據(jù)相應(yīng)的檢定規(guī)程在進行以上5個重要指標檢定時適用此方法。